牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒

【介绍】

   布鲁氏菌间接 ELISA 抗体检测试剂盒用于检测牛、羊、猪等动物血清中的布鲁氏菌特异性抗体。本试剂盒采用间接 ELISA 法，在酶标板微孔上预包被纯化的布鲁氏菌抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育后，若样品中含有布鲁氏菌病特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，加入酶标二抗，与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合，再经洗涤除去未结合的酶标记物，在微孔中加入 TMB 底物液，经酶催化形成蓝色产物，加入终止液终止反应后，用酶标仪 450nm 波长测定反应孔中的吸光度 OD 值。

【操作步骤】

1. 取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清取 100μl 加入到检测板孔中。同时设阴性对照 1 孔，阳性对照 2 孔，取阴性及阳性对照各 100μl分别加入反应孔中，轻轻振匀孔中样品（勿溢出）。

2. 盖上封板膜（可按实际需要自行裁剪），置 37℃温育 30分钟。

3. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，使用工作浓度洗涤液每孔加 250μl，甩去孔内液体，以上步骤重复 4~6 次，最后在干净吸水纸上拍干。

4. 每孔加酶标记物 100μl，盖上封板膜，置 37℃温育 30 分钟。

5. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗涤 4~6 次，方法同 3。切记最后在干净吸水纸上拍干。

6. 每孔加显色液 100μl，轻微震荡混匀、盖上封板膜 37℃避光显色 10 分钟。

7. 每孔加终止液 50μl，使反应终止，10 分钟内用酶标仪于

450nm 测定 OD 值。

【结果判定】

用酶标仪于 450nm（630nm 作参比波长）读取吸光度 OD 值。

试验成立的条件：

阴性对照（N）OD 值＜0.2，同时阳性对照（P）OD 值＞0.6。

计算方法：

样品 OD 值÷阳性对照 OD 均值＝S/P 值

阴阳性判断：

S/P 值＞0.3 判断为阳性；

S/P 值≤0.3 判断为阴性。

【贮存条件及有效期】2~8℃下贮存 12 个月

批准文号：兽药生字191478818